从系列诞生伊始，与那些极具特色的恐怖Boss们不期而遇就成了《生化危机》系列的核心支柱。无论是形态扭曲的铁娘子，还是势不可挡的暴君，系列每一部游戏中都充斥着他们可怖的身影。
第十名：复仇女神
这货专门猎杀S.T.A.R.S特警队员，而吉尔是最大的受害者。不管跑过几个场景，它都会一直紧追不舍，然后穿墙突袭。这台独眼龅牙的巨型杀戮机器总能使玩家心神不宁，比突然破窗而入的丧尸犬要恐怖百倍。
第九名： U-3
这只人体蜈蚣镇守幽闭迷宫，无惧枪弹，疯狂追击玩家。和它硬拼没有意义，因为它是打不死的，必须撑过一定时间才能过关。
逃出迷宫之后，玩家还要在悬崖上与其决战。此时，它会潜入地下，用螯发动出其不意的攻击。幸好这个阶段不缺弹药。
第八名：破壳而出的寄生虫
虽然这是一具冷冻了的尸体，但是那寄生虫还是像活的一样，保持着一副刚刚从人身体里钻出来的样子，不知道为什么，每当看到这个情景，我都会感到头皮发麻。
第七名：巨鲵
巨鲵是《生化危机4》中第一个大Boss，它是寄生虫实验失败的产物，全长在20米以上，寄居在湖里的它会吞噬一切湖面上的猎物，在这场战斗里，你必须舍弃枪支，用鱼叉与之搏斗。宏大的战斗场面，电影化的叙事镜头，标志着《生化危机》系列进入了新纪元。
第六名：巨人
巨人与巨鲵类似，也是《生化危机4》中身形巨大的Boss，它的个头有两层楼那么高，不费吹灰之力就能把你压扁，你必须掌握好战斗节奏，既要注意攻击Boss的弱点，也要留意小怪的动向。
第五名：暴君T-103型
暴君T-103型是T-002的改良版，是《生化危机2》的经典Boss，在《生化危机2重制版》中的优秀表现，让暴君在榜单上名列前茅。当里昂和暴君在长廊上相遇之后，它将一直追逐你到天涯海角，逐渐逼近的沉重脚步让你肾上腺素飙升、神经紧绷、冷汗直冒。
第四名：铁娘子
对于许多玩家来说，铁娘子是《生化危机4》的一大亮点，足以让人回忆起该系列的恐怖往昔。
游戏中未见其人，先闻其声——似乎是被冻死一般，她发出令人毛骨悚然的战栗和喘息。当大门打开，她扭动着身子，缓缓挪来。不管玩家打出多少子弹，她就是不会死。所以玩家只能选择逃亡。
接下来，她将在垃圾滑槽场景中与玩家再次相遇：相同的声音、相同的动作，不同的是外貌和攻击方式。此时，她会伸长手臂，将玩家拉入满是长刺的怀中，瞬间击杀。
第三名：丽莎·特雷沃
丽莎·特雷沃是《生化危机1》洋馆设计师特雷沃的女儿，她被绑架、被虐待，被注入多种病毒，具有了超强的恢复能力，成了一个死不了的行尸走肉，为了寻找自己的母亲，她不断的袭击女性研究员，并剥下对方的脸皮来贴在自己的身上。在与丽莎战斗时总让人充满无力感，最终她在看到自己母亲的尸骨后跳下了悬崖。
第二名：威廉·柏金
威廉·柏金是阿克雷研究所的研究员，是G病毒的发现者，在阿尔法小队抢走G病毒后，身受重伤的威廉·柏金将病毒注射到自己体内，随后他的身体不断变异，最终完全变成了一个充满仇恨的狂暴怪物。
第一名：玛格丽特·贝克
玛格丽特·贝克是《生化危机7》中贝克一家的女主人，她原本是只一个善良的农妇，但在病毒的影响下变得异常凶暴，游戏中，她会操纵一大群昆虫阻止伊桑通过老房子，她会把你困在洞穴里，让铺天盖地的虫子把你淹没，简直是密恐福利。
